ISO审议中的抗菌性和皮肤刺激性试验法
原载：全国染整新技术协作网简讯/2005/6/28yd5105
ISO接受了由日本纤维制品新功能评估协议会(JAFET)提出的纺织品抗菌性和皮肤 刺激性试验法提案，成立TC38/WG22/PTI进行审议，己于2001年4月在日本东京召开了 第一次会议，为纺织品抗菌整理建立国际标准迈出了坚实的一步。作者认为该提案在技术 上创新有如下几点:一是试验条件与服用状态接近，即增加了乾态菌转移法;二是精度高; 三是缩短了试验时间且省力。今简介于后:
一、茵转移法:
该提案试验抗菌性有二种方法;一是传统的湿润状态的菌液吸收法，二是新增的乾态 菌转移法。两者的概要如下表:
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试验菌 |
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↓ |
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前培养 |
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↓ |
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试验菌种的调整 |
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↓ |
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(湿态) ↓ |
(乾态) ↓ |
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菌液接种于试验布 |
膜滤器 (φ0·4µm)上采取菌株 |
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↓ |
↓ |
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培养 |
向试验布转移菌株(见示意图) |
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↓ |
↓ |
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冲洗试验布上菌株 |
培养 |
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↓ |
↓ |
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存活细菌数测定 |
冲洗试验布上菌株 |
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↓ |
↓ |
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抗菌性评估 |
存活细菌数测定 |
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↓ |
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静菌活性值logB-logC (抗)杀菌活性值logA-logC (试验成立条件:1ogB/logA＞1·5) |
抗菌性评估 |
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菌减少值logB-logC (试验成立条件：菌转移率25%以上) |
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二、ATP测定菌株数
通常将试样上冲洗菌株液在琼脂中培养 (37±1℃，24-48小时)后，再行测定其菌株数，操作复什且费时；建议采用ATP测定(生物发光法)，省时又省力仅需3-5分钟便可获得结果，ATP用于纺织品抗菌性测定菌株数是有创新意义的。
ATP测定原理：细菌中有一种腺甘三磷酸 (ATP)的活性物质，细菌一旦死亡则细菌内的分解酶会立刻将ATP分解掉，因而测定ATP含量，即可求得活细菌的数量。
方法是先用溶剂将细菌中的ATP萃取出来，在萃取液中加入萤光酶和萤光素，ATP与萤光试剂反应而发光，光强度由光电增管测定，通过不同细菌的ATP含量换算，便可求得菌株数，其精度可达1O2菌株/ml。
三、再生皮肤刺激性试验法
抗菌整理纺织品对人体皮肤刺激性试验，改由人皮细胞培养成再生皮肤模型上进行，以计算细胞存活率作为刺激性评估，其方法概要如下:
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准备试验布 |
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↓ |
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试验布贴附于再生皮肤模型上 |
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↓ |
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培养 |
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↓ |
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除去试验布 |
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↓ |
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活细胞MTT染色(将再生皮肤放入lmg/IMTT*培养基中37℃培养3小时) |
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↓ |
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色素萃取(用0.04M盐酸/异丙醇萃取色素Formazan) |
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↓ |
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测定萃取液吸光度 (570nm) |
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↓ |
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计算细胞存活率 |
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↓ |
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评估 |
注：*MTT系3-(4,5-Dimethyl-2-Thiazolyl)-2,5Diphenyl-2H-Tetrazolium Bromide的缩写。